Odwrotna transkrypcja PCR

Reakcja łańcuchowa polimerazy odwrotnej (RT-PCR) jest techniką laboratoryjną łączącą odwrotną transkrypcję RNA w DNA (w tym kontekście zwanym komplementarnym DNA lub cDNA) i amplifikacją określonych celów DNA przy użyciu reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR).

1. Jak stosuje się odwrotną transkryptazę w PCR?
2. Czy potrzebujesz odwrotnej transkryptazy do PCR?
3. Co to jest odwrotna transkrypcja?
4. Dlaczego cDNA jest stosowany do PCR?

Jak stosuje się odwrotną transkryptazę w PCR?

Używa enzymu zwanego odwrotną transkryptazą, aby zmienić określony kawałek RNA na pasujący kawałek DNA. Ten kawałek DNA jest następnie amplifikowany (wykonany w dużej liczbie) przez inny enzym zwany polimerazą DNA. Wzmocnione kopie DNA pomagają stwierdzić, czy gen wykonuje określoną cząsteczkę mRNA.

Czy potrzebujesz odwrotnej transkryptazy do PCR?

Odwrotna transkrypcja PCR lub RT-PCR umożliwia użycie RNA jako szablonu. Dodatkowy krok umożliwia wykrywanie i wzmocnienie RNA. RNA jest odwrotnie transkrybowany do komplementarnego DNA (cDNA), przy użyciu odwrotnej transkryptazy. Jakość i czystość szablonu RNA jest niezbędna do sukcesu RT-PCR.

Co to jest odwrotna transkrypcja?

Posłuchaj wymowy. (Ree-revers Tran-skrip-shun) W biologii proces w komórkach, za pomocą których enzym tworzy kopię DNA z RNA. Enzym, który wykonuje kopię DNA, nazywa się odwrotną transkryptazą i występuje w retrowirusach, takich jak ludzki wirus niedoboru odporności (HIV).

Dlaczego cDNA jest stosowany do PCR?

Reakcja łańcuchowa polimerazy

Odwrotna transkrypcja (RT) -PCR służy do amplifikacji celów RNA. Szablon RNA jest przekształcany w komplementarny (C) DNA przez enzym odwrotną transkryptazę. CDNA służy później jako szablon amplifikacji wykładniczej za pomocą PCR.